Uporaba stereo fluorescenčnega mikroskopa in previdnostni ukrepi
Navodila:
(1) Postavite list materiala na oder.
(2) Vklopite napetostni stabilizator fluorescentnega mikroskopa. Nato pritisnite zagonsko skupino, da prižgete UV žarnico in je ne izklopite v 15 minutah ter je ne zaženite znova v 3 minutah po izklopu.
(3) Obrnite vzbujevalni filter na v, filter za ločevanje barv na v in izberite blokirni filter 495 ali 475 nm.
(4) Za mikroskopsko preiskavo izberite mikroskop s fluorescenčnim objektivom uvFL40, uvFL100.
(5) Na stekelce dodajte nefluorescentno olje, najprej uporabite 40-kratni in nato 100-kratni fokusni mikroskop za preverjanje. Pojavi se fluorescenca.
(7) Ker fluorescenca fluorescentnih snovi postopoma slabi s časom, ko so obsevane z ultravijolično svetlobo, je treba med mikroskopskim pregledom pogosto spreminjati vidno polje.
(8) Mikroskopi z majhno povečavo uvFL10 ali uvFL20 se lahko uporabljajo tudi za pregledovanje materialov (pri uporabi leč z nizko močjo se ne dodaja fluorescentno olje).
Metoda snemanja fluorescenčne slike:
Fluorescenčna slika, ki jo vidi fluorescenčni mikroskop, ima tako morfološke značilnosti kot barvo in svetlost fluorescence. Pri ocenjevanju rezultatov je treba oboje združiti za celovito presojo. Rezultati se beležijo na podlagi subjektivnih kazalcev, to je vizualnega opazovanja delavcev. Kot splošno kvalitativno opažanje je načeloma zanesljivo. Z razvojem tehnologije in znanosti se objektivni indikatorji uporabljajo za beleženje rezultatov presoje v različni meri, kot so celični spektrofotometri, analizatorji slik in drugi instrumenti. Vendar je treba rezultate, ki jih zabeležijo ti instrumenti, združiti tudi s subjektivnimi presojami.
Fotografija s fluorescenčnim mikroskopom je zelo potrebna za snemanje fluorescenčnih slik. Ker je fluorescenco enostavno zbledeti in oslabiti, je treba rezultate beležiti v realnem času. Metoda je v bistvu enaka kot pri navadni fotomikrografiji. Uporabiti morate le fotoobčutljiv film visoke hitrosti, kot je ASA200 ali novejši ali 24. višji. Ker ima ultravijolična svetloba močan učinek na dušenje fluorescence, kot so markerji FITC, se bo svetlost fluorescence zmanjšala za 50 odstotkov, če bo obsevana z ultravijolično svetlobo 30 s. Zato, če je hitrost osvetlitve prepočasna, fluorescentne slike ni mogoče posneti. Splošni raziskovalni fluorescenčni mikroskopi imajo polavtomatske ali popolnoma avtomatske fotomikrografske sistemske naprave.
Previdnostni ukrepi:
(1) Upravljajte strogo v skladu z zahtevami tovarniških navodil za fluorescenčni mikroskop in ne spreminjajte programa po želji.
(2) Pregled je treba opraviti v temnem prostoru. Ko vstopite v temnico, priključite napajalnik in prižgite ultravisokotlačno živosrebrno žarnico 5-15 minut. Ko se močna svetloba svetlobnega vira ustali, se oči popolnoma prilagodijo temnici in začnejo opazovati osebek.
(3) Da preprečite, da bi ultravijolični žarki poškodovali oči, morate pri prilagajanju vira svetlobe nositi zaščitna očala.
(4) Čas pregleda je po možnosti 1-2 ur vsakič. Če preseže 90 minut, se bo jakost svetlobe ultravisokotlačne živosrebrne žarnice postopoma zmanjšala in fluorescenca bo oslabela; po 3-5 minutah obsevanja vzorca z ultravijoličnimi žarki bo tudi fluorescenca znatno oslabljena; zato ne sme preseči največ 2-2 ur. 3 ure
(5) Življenjska doba svetlobnega vira fluorescenčnega mikroskopa je omejena in vzorce je treba pregledati skupaj, da prihranite čas in zaščitite svetlobni vir. Ko je vreme vroče, je treba dodati ventilatorje za odvajanje toplote, nove žarnice pa je treba zabeležiti od začetka časa njihove uporabe. Če jo želite ponovno uporabiti, potem ko je žarnica ugasnila, morate počakati, da se žarnica dovolj ohladi, preden jo prižgete. Izogibajte se prižiganju svetlobnega vira večkrat na dan.
(6) Opazujte vzorec takoj po barvanju, saj bo fluorescenca sčasoma postopoma oslabela. Če je vzorec shranjen v polietilenski plastični vrečki pri 4 stopinjah, se lahko čas oslabitve fluorescence odloži in prepreči izhlapevanje pritrdilnega sredstva.
(7) Standard za presojo fluorescenčne svetlosti: na splošno je razdeljen na štiri ravni, to je "ena" - fluorescence ni mogoče opaziti ali pa je šibka. " plus "—Vidna je samo jasno vidna fluorescenca. " plus plus "—Viden in svetel
