Predhodni pregled in prilagoditev fluorescenčne mikroskopije:
(1) Pred vsakim opazovanjem fluorescence je treba redno preverjati poravnavo žarilne nitke, ostrenje optične poti, zaslonko zaslonke in nastavitve zaslonke vidnega polja fluorescenčne naprave.
(2) Ali so v pretvorniku nameščene zahtevane komponente filtra za vzbujanje/oddajanje fluorescence, ali je objektiv fluorescenčnega mikroskopa pravilno konfiguriran in ali so odstranjeni oljni madeži in prah pred lečo objektiva.
(3) Podobno je treba pri opazovanju razlike v prepuščeni svetlobi preveriti konjugacijo leče za fokusiranje s središčem in kontrastnega obroča z lečo objektiva.
(4) Preverite, ali je na nosilcu vzorca (predmetnem stekelcu, pokrovnem steklu in drugih posodah) kakšna tekočina ali prah in ali je debelina znotraj območja delovne razdalje, ki ga kalibrira leča objektiva. Narezani vzorci ne smejo biti predebeli, približno Priporočeno je manj kot ali enako 10 μm.
(5) Zaradi prisotnosti ultravijoličnih žarkov v viru svetlobe je treba nad nakladalno ploščad namestiti rjav senčnik, da preprečite UV poškodbe očesne mrežnice.
(6) Nestabilna napetost lahko skrajša življenjsko dobo visokonapetostnih živosrebrnih žarnic, zato je treba napajalniku svetlobnega vira dodati regulator napetosti.
(7) Za podaljšanje življenjske dobe živosrebrne žarnice jo je mogoče izklopiti le 15 minut po vklopu; Ko je fluorescentno napajanje živosrebrne sijalke izklopljeno, mora počakati vsaj 10 minut, da se ob ponovnem zagonu živosrebrne pare ohladijo nazaj v prvotno stanje, sicer bo to vplivalo na življenjsko dobo sijalke.
Opazovanje slik fluorescenčnega mikroskopa:
(1) Po vklopu vira fluorescenčne sijalke za približno 5-10 minut se intenzivnost vzbujanja stabilizira in vzorec se naloži za opazovanje; Da bi preprečili, da bi čezmerno vzbujanje svetlobe med ostrenjem in iskanjem slik povzročilo dušenje fluorescence vzorca, se najprej zmanjša zaslonka fluorescenčnega mikroskopa ali pa se doda filter ND, da se vzbujanje prilagodi na zmerno intenzivnost, in stopnica z vzorcem se premakne redno. Po določitvi zrcalne slike se prilagodi na stanje fluorescence za snemanje.
(2) Prilagoditve s slabo kakovostjo slike. Potrebni prilagoditveni ukrepi, ki jih je mogoče izvesti, razen faktorjev priprave vzorca, so:
① Izključite naprave za senčenje ali omejevanje na optični poti slikanja, kot so dodatki DIC, filtri ND itd.
② Ponovno prilagodite ostrenje in odprtino zaslonke zbiralnika fluorescenčnega mikroskopa.
③ Previdno prilagodite obroč za korekcijo pokritosti objektiva fluorescenčnega mikroskopa.
