Metoda neposrednega štetja mikrobnega mikroskopa
Eksperimentalni koraki (metoda neposrednega štetja z mikrobnim mikroskopom)
1. Redčenje
Suspenzijo pivskega kvasa ustrezno razredčite. Če bakterijska raztopina ni koncentrirana, je ni treba redčiti.
2. Soba za mikroskopsko preiskavo in štetje
Preden dodate vzorce, izvedite mikroskopski pregled štetne komore štetne plošče. Če je umazanija, jo je treba pred štetjem očistiti.
3. Dodajte vzorce
Čisto in suho ploščo za štetje krvnih celic pokrijte s pokrovnim steklom in nato s sterilno kapalko s finim ustjem kapnite majhno kapljico (ne preveč) razredčene raztopine kvasa z roba pokrovnega stekla. Pustite, da bakterijska raztopina vstopi v štetno komoro vzdolž reže s kapilarno permeacijo. Na splošno lahko števno komoro napolnimo z raztopino bakterij. Pazite, da ne ustvarite mehurčkov.
4. Mikroskopsko štetje
Po 5 minutah počitka postavite ploščo za štetje krvnih celic na mizico mikroskopa, najprej uporabite mikroskop z nizko močjo, da poiščete lokacijo sobe za štetje, nato pa preklopite na mikroskop z visoko močjo za štetje. Če se pred štetjem ugotovi, da je bakterijska raztopina pregosta ali preredka, je treba razredčino pred štetjem ponovno prilagoditi. Splošna zahteva za redčenje vzorca je, da mora biti približno 5-10 bakterijskih telesc na majhno celico. Za štetje izberite 5 celic iz vsake sobe za štetje (izbirne 4 vogalne in sredinske celice). Micelij, ki se nahaja na mrežni črti, običajno šteje samo na zgornji in desni črti. Če kvasovke vzklijejo in velikost popka doseže polovico matične celice, se izmerita dve bakterijski številki. Za štetje vzorca je treba vsebnost bakterij v vzorcu izračunati na podlagi vrednosti, dobljenih iz dveh štetnih komor.
5. Očistite ploščo za štetje krvnih celic
Po uporabi ploščo za štetje krvnih celic sperite z vodnim stolpcem na vodni pipi. Za pranje ne uporabljajte trdih predmetov. Po pranju jo sami posušite na zraku ali s sušilcem za lase. Z mikroskopskim pregledom opazujte, ali so v vsaki majhni celici ostanki bakterijskih teles ali drugih oborin. Če ni čist, ga je treba večkrat oprati, dokler ni čist.
