Laserski konfokalni vrstični mikroskop
Laserski konfokalni vrstični mikroskop (laserski konfokalni vrstični mikroskop), ki uporablja laser kot vir svetlobe za skeniranje, hitro skeniranje in slikanje točke za točko, vrstico za črto in površino za črto, skenirajoči laser in zbirka fluorescence si delita objektivno lečo in objektivno lečo skenira žarišče laserske svetlobe, ki je hkrati točka slikanja snovi. Ker je valovna dolžina laserskega žarka kratka in je žarek zelo tanek, ima konfokalni laserski vrstični mikroskop visoko ločljivost, ki je približno 3-krat večja od navadnega optičnega mikroskopa. Ko je sistem enkrat fokusiran, je skeniranje omejeno na eno ravnino vzorca. Ko je globina ostrenja različna, je mogoče dobiti slike različnih globin vzorca. Te slikovne informacije so shranjene v računalniku. Z računalniško analizo in simulacijo je mogoče prikazati tridimenzionalno strukturo vzorca celice.
Zakaj potrebujete konfokalni mikroskop?
1. Po prizadevanjih in izboljšavah naših velikih predhodnikov je optični mikroskop dosegel točko popolnosti. Pravzaprav nam lahko običajni mikroskopi preprosto in hitro zagotovijo čudovite mikroskopske slike. Zgodil pa se je dogodek, ki je prinesel revolucionarno inovacijo v ta skoraj popoln mikroskopski svet, to je izum "laserskega skenirajočega konfokalnega mikroskopa". Značilnost te nove vrste mikroskopa je, da sprejme optični sistem, ki samo ekstrahira informacije o sliki na površini, kjer je koncentriran fokus, in obnovi pridobljene informacije v slikovnem pomnilniku med spreminjanjem fokusa, tako da je mogoče popolne 3D informacije pridobljeno. Ostra podoba inteligence. S to metodo je mogoče enostavno pridobiti podatke o obliki površine, ki jih ni mogoče potrditi z običajnim mikroskopom. Poleg tega sta za običajne optične mikroskope "povečanje ločljivosti" in "poglabljanje globine fokusa" nasprotujoča si pogoja, zlasti pri velikih povečavah je to protislovje bolj izrazito, vendar je v smislu konfokalnih mikroskopov ta problem enostavno rešljiv.
2. Prednosti konfokalnega optičnega sistema
Shema laserskega konfokalnega mikroskopa
Konfokalni optični sistem izvaja točkovno osvetlitev vzorca, odbito svetlobo pa sprejme tudi točkovni receptor. Ko je vzorec postavljen v položaj fokusa, lahko skoraj vsa odbita svetloba doseže fotoreceptor, in ko vzorec ni izostren, odbita svetloba ne more doseči fotoreceptorja. To pomeni, da bo v konfokalnem optičnem sistemu prikazana samo slika, ki sovpada z goriščem, svetlobne lise in neuporabna razpršena svetloba pa bodo zaščitene.
3. Zakaj uporabljati laser?
V konfokalnem optičnem sistemu je vzorec osvetljen točkovno, odbito svetlobo pa sprejme tudi točkovni fotoreceptor. Zato je potreben točkovni vir svetlobe. Laserji so zelo točkovni viri svetlobe. V večini primerov se laserski viri svetlobe uporabljajo kot viri svetlobe za konfokalne mikroskope. Poleg tega so značilnosti monokromatičnosti, usmerjenosti in odlične oblike žarka prav tako pomembni razlogi za njegovo široko uporabo.
4. Možno je opazovanje v realnem času, ki temelji na hitrem skeniranju
Za lasersko skeniranje vodoravna smer sprejme akustični optični deflektor (AO element), navpična smer pa sprejme servo elektronsko nadzorovano zrcalo za skeniranje žarka (Servo Galvano-ogledalo). Ker akustično-optična odklonska enota nima mehanskega vibracijskega dela, lahko izvaja hitro skeniranje in je možno opazovanje v realnem času na zaslonu monitorja. To visokohitrostno slikanje je zelo pomembna postavka, ki neposredno vpliva na hitrost ostrenja in iskanja položaja.
