Kako prilagoditi intenzivnost laserja konfokalnega mikroskopa z laserskim skeniranjem
Za intenzivnost laserja sta na voljo dva faktorja prilagajanja: gumb za nadzor moči in aku-optični nastavljivi filter (AOTF)
1. Gumb za nadzor moči: običajno nastavljen na 30 % največje vrednosti. Povečanje izhodne moči bo skrajšalo življenjsko dobo laserja in povzročilo laserski šum. Za najboljšo intenzivnost je treba najprej prilagoditi AOTF, PMT itd.
2. Akustično optični nastavljiv filter: nadzoruje vzbujevalni svetlobni žarek in intenzivnost ter lahko vklopi ali izklopi laser ali ga prilagodi med 0-100 % v milisekundah. To omogoča uporabo različnih laserskih žarkov za vsako slikovno točko in izbiro želene intenzivnosti.
Načelo delovanja: uporablja Braggov uklonski učinek zvočnih valov, ki se širijo v različnih medijih, na vpadni Braggov uklon v mediju za širjenje. Ko je vhod RF signala določene frekvence, AOTF ukloni vpadno polikromatsko svetlobo in izbere monokromatsko svetlobo z valovno dolžino vhoda. Valovna dolžina monokromatske svetlobe ustreza ena-proti-ena z RF frekvenco f. Dokler je električni signal uglašen, se lahko izhodna valovna dolžina hitro in naključno spremeni. AOTF dosega stalno prilagajanje intenzivnosti laserja in ima funkcijo hitrega prilagajanja, izvaja lokalno stimulacijo in skeniranje, hitro preklapljanje valovne dolžine (nivo mikrosekund). Pri laserski konfokalni mikroskopiji fotopomnoževalne cevi ne morejo povečati intenzivnosti laserja, lahko pa prilagodijo intenzivnost svetlobe po slikanju. Zato lahko s prilagajanjem napetosti fotopomnoževalne cevi prilagajamo svetlost slike. Poleg tega velikost žariščne luknjice vpliva na količino fotona in lahko prilagodi tudi svetlost slike. Fotopomnoževalna cev je posebna vakuumska cev, ki je izjemno občutljiva na ultravijolično, vidno in bližnjo-infrardečo svetlobo. Lahko poveča vhodni šibek svetlobni signal za 108-krat, kar omogoča merjenje svetlobnega signala.
