Ali ste kdaj razumeli osnovna načela fazno kontrastne mikroskopije?
Faznokontrastni mikroskop je izumil nizozemski znanstvenik Zernike leta 1935 za opazovanje neobarvanih preparatov. Pri živih celicah in neobarvanih bioloških vzorcih se zaradi razlike v lomnem količniku in debelini mikrostrukture vsakega dela celice, ko svetlobni val prehaja skozi, valovna dolžina in amplituda ne spremenita, spremeni se le faza (amplitudna razlika ), ki je človeškemu očesu neviden. opazovati. Mikroskop s faznim kontrastom spreminja fazno razliko in uporablja uklon svetlobe in interferenčne pojave za spreminjanje fazne razlike v amplitudno razliko za opazovanje živih celic in neobarvanih vzorcev. Razlika med faznokontrastnim mikroskopom in navadnim mikroskopom je v tem, da se namesto spremenljive diafragme uporablja obročasta zaslonka, namesto navadne objektivne leče objektiv s fazno ploščo in teleskop za koaksialnost.
Osnovna načela fazno kontrastne mikroskopije:
Z uporabo razlike v lomnem količniku in debelini med različnimi strukturnimi komponentami predmeta se razlika optične poti, ki poteka skozi različne dele predmeta, pretvori v razliko v amplitudi (svetlobni jakosti) in skozi zbiralno lečo z obročasto diafragmo in fazna razlika s fazno ploščo Leča objektiva realizira opazovalni mikroskop. Uporablja se predvsem za opazovanje živih celic ali neobarvanih delov tkiva, včasih pa se lahko uporablja tudi za opazovanje obarvanih vzorcev brez kontrasta.
Optična razlika v poti vidne svetlobe, ki prehaja skozi vzorec, se spremeni v amplitudno razliko, s čimer se izboljša kontrast med različnimi strukturami in naredijo različne strukture jasno vidne. Svetloba se po prehodu skozi vzorec lomi, odstopa od prvotne optične poti in zakasni za 1/4λ (valovna dolžina). Če se poveča ali zmanjša za 1/4λ, postane razlika optične poti 1/2λ in oba žarka interferirata za svetlobno osjo. Okrepite, povečajte ali zmanjšajte amplitudo, izboljšajte kontrast.
Mikroskop s faznim kontrastom ima dve funkciji, ki ju drugi mikroskopi nimajo: ① loči neposredno svetlobo (svetlobo ozadja v vidnem polju) od svetlobe, ki jo ulomi predmet; ② odstrani približno polovico valovne dolžine iz faze, tako da ne more medsebojno delovati, kar povzroči spremembo intenzitete.
