Fluorescenčne mikroskope lahko glede na princip svetlobne poti razdelimo na dve vrsti:
1. Transmisijski fluorescenčni mikroskop
Pri starejših fluorescenčnih mikroskopih vzbujevalni svetlobni vir prehaja skozi material vzorca skozi kondenzator, da vzbudi fluorescenco. Prednost je, da je fluorescenca močna pri majhni povečavi, slabost pa je, da fluorescenca oslabi, ko se povečava povečuje. Zato je primeren samo za opazovanje materialov večjih vzorcev.
2.Epifluorescenčna mikroskopija
Vzbujevalna svetloba pada navzdol od leče objektiva na površino vzorca, tj. ista leča objektiva se uporablja kot osvetljevalni kondenzor in leča objektiva za zbiranje fluorescence.
Na optično pot je potrebno dodati dihroično zrcalo (dihroično zrcalo), ki je pod kotom 45o glede na optično os. Vzbujevalna svetloba se odbije v lečo objektiva in koncentrira na vzorec. Fluorescenca, ki jo ustvari vzorec, se odbija od površine leče objektiva in pokrova. Vzbujevalna svetloba, ki se odbije na površini stekelca, istočasno vstopi v lečo objektiva in se vrne v dihroični razdelilnik žarka, da loči vzbujevalno svetlobo in fluorescenco. Preostalo vzbujevalno svetlobo nato absorbira blokirni filter. Če uporabljate različne kombinirane vložke filtra za vzbujanje/dvobarvnega razdelilnika žarka/filtra za blokiranje, lahko zadovoljite potrebe različnih produktov fluorescenčne reakcije.
Prednost tovrstnega fluorescenčnega mikroskopa je, da je vidno polje enakomerno osvetljeno, slika je jasna in večja kot je povečava, močnejša je fluorescenca.
Katere so glavne kategorije optičnih mikroskopov?
1. Navadni optični mikroskop
Navadni optični mikroskopi so v glavnem sestavljeni iz naslednjih delov: osvetljevalni sistem, ki vključuje svetlobni vir in kondenzor; sistem optične povečave, ki je sestavljen iz leče objektiva in okularja. Je najbolj kritičen del mikroskopa in je zasnovan tako, da se izognemo pretirani sferični in kromatski aberaciji, tako okular kot leča objektiva sestavljena iz kompleksnih skupin leč.
2. Laserski konfokalni vrstični mikroskop
Laserski konfokalni vrstični mikroskop se sliši zelo visoko in zapleteno. Pravzaprav preprosto uporablja laser kot svetlobni vir za skeniranje za hitro skeniranje in slikanje predmetov točko za točko, črto za črto in površino za površino.
Glede na krajšo valovno dolžino laserskega žarka je sam žarek zelo tanek, kar določa, da ima konfokalni laserski vrstični mikroskop visoko ločljivost, ki je približno trikrat večja od navadnega optičnega mikroskopa. Ta vrsta mikroskopa se uporablja za opazovanje morfologije celic in kvantitativno analizo znotrajceličnih biokemičnih komponent ter merjenje morfologije celic.
3. Mikroskop s temnim poljem
V središču kondenzorja mikroskopa s temnim poljem je svetlobna plošča, ki preprečuje, da bi osvetljevalna svetloba neposredno vstopila v lečo objektiva. Samo svetloba, ki jo vzorec odbije in ulomi, lahko vstopi v lečo objektiva. Zato je ozadje vidnega polja črno, robovi predmetov pa svetli.
