Širitev prednosti mikroskopije večfotonske laserske skeniranja na vključitev
Laserski skenirni multifotonski mikroskop je pomembno izboljšanje optične mikroskopije, ki se v glavnem kaže v sposobnosti opazovanja globokih struktur živih celic, fiksnih celic in tkiv ter pridobi jasne in ostre večplastne z-ravninske strukture, in sicer optične rezine, ki jih je mogoče uporabiti za konstruiranje tridimenzionalnih trdnih struktur. Konfokalni mikroskop uporablja laserski vir svetlobe, ki se razširi za zapolnitev celotne goriščne ravnine objektivne leče, nato pa se z konvergiranim točkam na goriščni ravnini vzorca konvergira skozi sistem objektiva objektivne leče. Glede na numerično odprtino objektivne leče je premer svetle osvetlitvene točke približno 0. 25-0. 8 μ m, globina pa je približno 0. 5-1. 5 μ m. Velikost konfokalne točke določa mikroskopska zasnova, laserska valovna dolžina, objektivne značilnosti, nastavitve stanja skeniranja enote in lastnosti vzorca. Območje osvetlitve in globina poljskega mikroskopa sta velika, medtem ko je osvetlitev konfokalnega mikroskopa osredotočena na žariščno točko na goriščni ravnini. Osnovna prednost konfokalne mikroskopije je, da lahko izvaja fino optično sekcijo na debelih fluorescentnih vzorcih (do 5 0 μm ali več) z debelino približno 0,5 do 1,5 μm. Serijo slik optične rezine lahko dobite s premikanjem vzorca navzgor in navzdol z mikroskopom z osi z osi. Zbirka informacij o slikah je nadzorovana v ravnini * *, brez motenj iz signalov, ki jih oddajajo drugi položaji na vzorcu. Po odstranitvi vpliva fluorescence v ozadju in povečanju razmerja med signalom in šumom se kontrast in ločljivost konfokalnih slik znatno izboljšata v primerjavi s tradicionalnimi slikami fluorescence osvetlitve polja. V mnogih primerkih se zapletene strukturne komponente prepletajo, da tvorijo zapletene sisteme, a ko lahko zbiramo dovolj optičnih odsekov, lahko s programsko opremo rekonstruiramo v treh dimenzijah. Ta eksperimentalna metoda se v bioloških raziskavah široko uporablja za razjasnitev zapletenih strukturnih in funkcionalnih razmerij med celicami ali tkivi.
