Razlika med dvofotonsko mikroskopijo in lasersko konfokalno mikroskopijo
Laserski konfokalni mikroskop je skupek opazovalnih, analiznih in izhodnih sistemov, ki kot svetlobni vir uporabljajo laser, princip konjugiranega ostrenja in naprave na osnovi tradicionalnega optičnega mikroskopa ter digitalno obdelavo slike opazovanega predmeta z uporabo računalnika. Glavni sistemi vključujejo laserske svetlobne vire, avtomatske mikroskope, skenirne module (vključno s konfokalnimi optičnimi potnimi kanali in luknjicami, skenirajočimi zrcali, detektorji), procesorje digitalnih signalov, računalnike in naprave za izhod slike (zasloni, barvni tiskalniki). Z uporabo laserskega vrstičnega konfokalnega mikroskopa je možno opraviti tomografijo in slikanje opazovanega vzorca. Zato je možno opazovati in analizirati tridimenzionalno prostorsko strukturo celic brez poškodb.
Hkrati je laserska skenirajoča konfokalna mikroskopija tudi močno orodje za dinamično opazovanje živih celic, večkratno imunofluorescenčno označevanje in ionsko fluorescenčno označevanje. Natančno analizira bistvo spektra in loči signale od različnih oznak z zelo prekrivajočimi se emisijskimi spektri.
Najpomembnejše je, da lahko pri večbarvnem fluorescenčnem barvanju popolnoma odpravi vpliv fluorescenčnega preslušavanja, hkrati pa zmanjša izgubo fluorescenčnega signala vzorca. Vse to so stvari, ki jih običajna ogledala ne morejo doseči.
Razmerje goriščne razdalje med mikroskopskim objektivom in okularjem
Različni principi
1. Fluorescenčni mikroskop: uporablja ultravijolično svetlobo kot vir svetlobe za osvetlitev preizkušanega predmeta, zaradi česar oddaja fluorescenco, nato pa opazuje obliko in položaj predmeta pod mikroskopom.
2. Laserski konfokalni mikroskop: Na podlagi slikanja s fluorescenčno mikroskopijo je nameščena naprava za lasersko skeniranje za vzbujanje fluorescenčnih sond z uporabo ultravijolične ali vidne svetlobe.
Različne lastnosti
1. Fluorescenčni mikroskop: uporablja se za preučevanje absorpcije, transporta, porazdelitve in lokalizacije snovi v celicah. Nekatere snovi v celicah, kot je klorofil, lahko po izpostavitvi ultravijoličnemu sevanju oddajajo fluorescenco; Nekatere snovi same morda ne oddajajo fluorescence, če pa jih obarvamo s fluorescenčnimi barvili ali fluorescentnimi protitelesi, lahko oddajajo fluorescenco tudi pod ultravijoličnim sevanjem.
2. Laserski konfokalni mikroskop: uporaba računalnika za obdelavo slik za pridobivanje fluorescentnih slik notranje mikrostrukture celic ali tkiv in za opazovanje fizioloških signalov, kot so Ca2+, vrednost pH, membranski potencial in spremembe morfologije celic na subcelični ravni.
