Fluorescenčni mikroskopi so razdeljeni na dve vrsti glede na njihove svetlobne poti:
1. Fluorescenčni mikroskop prenosa: Vir vzbujanja svetlobe se uporablja za vzbujanje fluorescence s prehodom skozi vzorčni material skozi kondenzatorsko lečo. Uporabljajo se lahko tudi pogosto uporabljeni koncentratorji temnega polja, navadni koncentratorji pa se lahko uporabijo za prilagajanje reflektorja tako, da preusmerite in stransko vzbujajo svetlobo na vzorec. To je relativno staromoden fluorescenčni mikroskop. Njegova prednost je močna fluorescenca pri majhni povečavi, vendar je njegova pomanjkljivost, da se njegova fluorescenca zmanjšuje s povečanjem povečave. Zato je bolje za opazovanje večjih vzorčnih materialov.
2. Padajoči svetlobni fluorescenčni mikroskop je nova vrsta fluorescenčnega mikroskopa, ki se razvije v sodobnem času. Za razliko od zgoraj navedenega svetloba vzbujanja pade z objektivne leče navzdol na površino vzorca, pri čemer uporablja isto objektivno lečo kot kondenzator osvetlitve in objektivno lečo za zbiranje fluorescence. Na optično pot je treba dodati dvojni barvni snop, ki je ločen 45 stopinj ločen od svetlobnega urana. Kot, vzbujevalna luč se odraža v objektivni leči in se osredotoča na vzorec. Fluorescenca, ki nastane z vzorcem, in vzbujevalna svetloba, ki se odraža s površine objektivne leče in pokrovnega stekla, vstopi v objektivno lečo in se vrne v dvojni barvni snop, ki ločuje vzbujevalno svetlobo in fluorescenco. Preostala vzbujevalna luč se nato absorbira z blokirnim filtrom. Če se uporabljajo različne kombinacije vzbujevalnih filtrov/dvojnih ločevalcev barvnih žarkov/blokiranih filtrov, lahko zadovoljijo potrebe različnih fluorescentnih reakcijskih produktov. Prednosti tega fluorescenčnega mikroskopa so enakomerna osvetlitev polja, jasno slikanje in močnejša fluorescenca z večjo povečavo.
Navodila za uporabo fluorescenčnega mikroskopa.
1. Vklopite svetlobni vir, ultra visoko tlačno živosrebrno svetilko je treba nekaj minut predgreti, da pridete do svetle točke.
2. Fluorescenčna mikroskopija prenosa zahteva namestitev potrebnega vzbujevalnega filtra med virom svetilke in kondenzatorja ter ustrezni blokavni filter za objektivnim lečo. Fluorescenčni mikroskop padajočega svetlobe mora v režo optične poti vstaviti potreben filter vzbujanja/dvojnega barvnega snopa/blokiranega filtrirnega bloka.
3. Opazujte z mikroskopom z nizko močjo in nastavite sredino vira svetlobe glede na napravo nastavitve različnih vrst fluorescenčnih mikroskopov, tako da se nahaja na sredini celotnega osvetlitvenega mesta.
4. Postavite vzorec in ga osredotočite na opazovanje. Pozornost je treba nameniti med uporabo: Ne upoštevajte neposredno z očmi, preden namestite filter, da se izognete poškodbam oči; Pri opazovanju vzorcev z oljnim mikroskopom je treba uporabiti poseben ne fluorescenčni oljni mikroskop; Ko je živosrebrna svetilka visokega tlaka izklopljena, je ni mogoče takoj vklopiti. Za ponovni zagon traja 5 minut, sicer bo nestabilno in vplivalo na življenjsko dobo svetilke živega srebra.
