Razlika med navadno optično mikroskopijo in fluorescenčno mikroskopijo
Optični mikroskop: je optični instrument, ki uporablja optične principe za povečavo in slikanje majhnih predmetov, ki jih človeško oko ne more razločiti, z namenom pridobivanja mikrostrukturnih informacij za ljudi.
Fluorescentni mikroskop: Fluorescentni mikroskop uporablja ultravijolično svetlobo kot vir svetlobe za osvetlitev preizkušanega predmeta, zaradi česar oddaja fluorescenco, nato pa opazuje obliko in položaj predmeta pod mikroskopom. Fluorescenčna mikroskopija se uporablja za preučevanje absorpcije, transporta, porazdelitve in lokalizacije znotrajceličnih snovi. Nekatere snovi v celicah, kot je klorofil, lahko po izpostavitvi ultravijoličnemu sevanju oddajajo fluorescenco; Čeprav nekatere snovi same ne morejo oddajati fluorescence, lahko oddajajo fluorescenco tudi po tem, ko so obarvane s fluorescenčnimi barvili ali fluorescentnimi protitelesi in obsevane z ultravijolično svetlobo. Fluorescenčna mikroskopija je eno od orodij za kvalitativne in kvantitativne raziskave teh snovi.
Optični mikroskop je na splošno sestavljen iz mize, sistema osvetlitve reflektorja, objektiva, okularja in mehanizma za ostrenje. Sistem osvetlitve reflektorjev lahko pridobi različne metode opazovanja, kot so temne točke na svetlem ozadju (znano kot osvetlitev svetlega polja) ali svetle točke na temnem ozadju (znano kot osvetlitev temnega polja), s spreminjanjem načina osvetlitve, da bi bolje odkrili in opazovati fine strukture v različnih situacijah.
Fluorescentna mikroskopija in navadna mikroskopija imata naslednje razlike:
1. Metoda osvetlitve je običajno kapljična, kjer se vir svetlobe projicira na vzorec skozi lečo objektiva;
2. Vir svetlobe je ultravijolična svetloba, s krajšo valovno dolžino in višjo ločljivostjo kot običajni mikroskopi;
3. Obstajata dva posebna filtra, tisti pred virom svetlobe se uporablja za filtriranje vidne svetlobe, tisti med okularjem in lečo objektiva pa se uporablja za filtriranje ultravijolične svetlobe za zaščito človeškega očesa.
Fluorescenčna mikroskopija je prav tako vrsta optičnega mikroskopa, glavna razlika pa je v različnih valovnih dolžinah vzbujanja med obema. To določa razlike v strukturi in uporabi med fluorescentnimi mikroskopi in običajnimi optičnimi mikroskopi.
Fluorescenčna mikroskopija je temeljno orodje za imunofluorescenčno citokemijo. Sestavljen je iz glavnih komponent, kot so vir svetlobe, sistem filtrirnih plošč in optični sistem. Gre za uporabo določene valovne dolžine svetlobe za vzbujanje vzorca in oddajanje fluorescence, ki se poveča s sistemom objektiva in okularja za opazovanje fluorescenčne slike vzorca.
