Metoda neposrednega štetja mikroorganizmov z uporabo mikroskopa
Uporaba hemocitometra za neposredno štetje mikroorganizmov pod mikroskopom je pogosto uporabljena metoda za štetje mikrobov. Prednost te metode je njena intuitivnost in hitrost. Ustrezno razredčeno bakterijsko suspenzijo (ali suspenzijo spor) postavite v komoro za štetje med objektno stekelce hemocitometra in pokrovno stekelce ter preštejte pod mikroskopom. Zaradi konstantne prostornine števne sobe (0,1 mm2) se lahko skupno število mikroorganizmov na enoto prostornine pretvori glede na število mikroorganizmov, opazovanih pod mikroskopom. Ker ta metoda izračuna vsoto živih in odmrlih bakterijskih celic, je znana tudi kot metoda skupnega števila bakterij.
Plošča za štetje krvnih celic je običajno posebej oblikovano stekelce s štirimi utori, ki tvorijo tri ploščadi. Srednja ploščad je razdeljena na polovico s kratkim vodoravnim utorom, na vsaki strani ploščadi je vgravirana mreža. Vsaka mreža je razdeljena na devet velikih kvadratov, velik kvadrat na sredini pa je štetna soba, kjer se izvaja štetje mikrobov. Struktura plošče za štetje krvnih celic je prikazana na sliki VIII-1.
Na splošno obstajata dve specifikaciji za lestvico števne sobe. Ena je, da je velik kvadrat razdeljen na 16 srednjih kvadratov, vsak srednji kvadrat pa je nadalje razdeljen na 25 majhnih kvadratov (slika VIII -2); Druga metoda je razdelitev velikega kvadrata na 25 srednjih kvadratov, vsak srednji kvadrat pa nadalje razdeljen na 16 majhnih kvadratov (slika VIII -1, C). Toda ne glede na velikost štetja je število majhnih polj v vsakem velikem kvadratu enako, to je 16 × 25=400 majhnih polj, kot je prikazano na sliki VIII-2.
Če je stranica vsakega velikega kvadrata 1 mm, je ploščina vsakega velikega kvadrata 1 mm2. Po prekrivanju s pokrovnim steklom je višina med stekelcem in pokrovnim steklom 0,1 mm, tako da je prostornina prostora za štetje 0,1 mm3.
Pri štetju običajno preštejemo skupno število bakterij v petih kvadratih, nato pa dobimo povprečno vrednost vsakega kvadrata. Če ga pomnožimo s 16 ali 25, dobimo skupno število bakterij v velikem kvadratu, ki se nato pretvori v skupno število bakterij v 1 ml raztopine bakterij.
