Določanje števila mikroorganizmov - metoda mikroskopskega direktnega štetja!
Temeljno
Mikroskopska metoda neposrednega štetja je preprosta, hitra in intuitivna metoda, pri kateri se majhna količina suspenzije vzorca, ki ga želite testirati, namesti na posebno stekleno stekelce (znano tudi kot števec bakterij) z določeno površino in prostornino ter štetje neposredno pod mikroskop. Trenutno pogosto uporabljeni števci bakterij doma in v tujini vključujejo: ploščo za štetje krvnih celic, števec bakterij Peteroff-Hauser in števec bakterij Hawksley itd. Vse jih je mogoče uporabiti za štetje suspenzij, kot so kvasovke, bakterije in spore plesni ter osnovni principi so enaki. Zadnja dva števca bakterij imata po prekrivanju s pokrovnim steklom skupno prostornino 0.02 mm3, razdalja med pokrovnim steklom in stekelcem pa je le 0,02 mm, zato majhne celice, kot je npr. bakterije je mogoče opazovati in prešteti z oljno imerzijsko lečo. Poleg uporabe teh števcev bakterij obstaja tudi metoda ocenjevanja neposrednega opazovanja razmerja med površino brisa in površino vidnega polja pod mikroskopom. Ta metoda se običajno uporablja za bakteriološko preiskavo mleka. Prednost mikroskopske metode neposrednega štetja je, da je intuitivna, hitra in enostavna za uporabo. Toda slabost te metode je, da so izmerjeni rezultati običajno seštevek mrtvih in živih bakterij. Trenutno obstaja nekaj metod za odpravo te pomanjkljivosti, kot je kombiniranje mikrokomorne kulture, ki obarva žive bakterije (kratek čas) in dodajanje inhibitorjev celične delitve, da se doseže namen štetja samo živih bakterij.
V tem poskusu je bil kot primer uporabljen hemocitometer za neposredno štetje pod mikroskopom. Za načine uporabe drugih dveh števcev bakterij si oglejte navodila posameznega proizvajalca. Neposredno štetje pod mikroskopom s hemocitometrom je pogosto uporabljena metoda štetja mikrobov. Števnica je posebej izdelan stekleni tobogan, na katerem štiri reže tvorijo tri ploščadi; širša ploščad v sredini je razdeljena na dve polovici s kratko vodoravno režo, vsaka stran ploščadi pa je obložena z mrežo. Vsaka mreža je razdeljena na devet velikih kvadratov, srednji veliki kvadrat pa je števna komora. Lestvica sobe za štetje ima na splošno dve specifikaciji, ena je, da je velik kvadrat razdeljen na 25 srednjih kvadratov, vsak srednji kvadrat pa je razdeljen na 16 majhnih kvadratov; drugo pa je, da je velik kvadrat razdeljen na 16 srednjih kvadratov in vsak srednji kvadrat je razdeljen na 25 majhnih kvadratov, toda ne glede na vrsto štetne plošče je 400 majhnih kvadratkov vsak velik kvadrat. Stranska dolžina vsakega velikega kvadrata je 1 mm, nato pa je površina vsakega velikega kvadrata 1 mm 2. Ko je pokrovno steklo pokrito, je višina med pokrovnim in drsnim steklom 0,1 mm, tako da je prostornina števna komora je 0,1 mm (ena desettisočinka mililitra).
