Kakšen je optični sistem fluorescenčnega mikroskopa?
Pod mikroskopom navadni pokončni mikroskopi zaradi optičnih lastnosti nekaterih snovi ne morejo jasno videti njihove notranje strukture, imajo pa še eno značilnost. Na primer, nekatere snovi v celicah, kot je klorofil, lahko po obsevanju z ultravijoličnimi žarki fluorescirajo; čeprav nekatere snovi same ne morejo fluorescirati, lahko fluorescirajo tudi po barvanju s fluorescenčnimi barvili ali fluorescentnimi protitelesi po obsevanju z ultravijolično svetlobo. Z uporabo optičnih lastnosti te snovi je bila razvita profesionalna mikroprikazovalna naprava, in sicer fluorescenčni mikroskop. Fluorescenčna mikroskopija je orodje za kvalitativne in kvantitativne raziskave takih snovi. Natančna definicija fluorescenčnega mikroskopa se nanaša na mikroskop, ki izbere določeno valovno dolžino vzbujevalne svetlobe, ki jo oddaja visokotlačna živosrebrna žarnica ali podoben svetlobni vir, da vzbudi določene snovi, označene s fluorescenčnimi barvili v celicah, da oddajajo fluorescenco in opazujejo porazdelitev določene komponente celice. Izvedejo se lahko tudi polkvantitativne analize. Fluorescenčna mikroskopija je eno od orodij za kvalitativne in kvantitativne raziskave tovrstnih snovi.
Prilagoditev sistema optične poti osvetlitve mikroskopa je namenjena zagotavljanju enakomerne in zadostne osvetlitve vidnega polja mikroskopa. Ko je mikroskop prvič nameščen in odpravljen napak, je treba sistem osvetlitvene optične poti dobro nastaviti. To je pomembno sredstvo in najosnovnejša zahteva za pravilno uporabo mikroskopa in pridobivanje pravilnih in zanesljivih rezultatov. Poleg tega je pravilno obvladovanje prilagoditve sistema optične poti osvetlitve nujen korak po zamenjavi žarnice svetlobnega vira med uporabo mikroskopa, prav tako pa je nujno sredstvo za občasno preverjanje delovanja mikroskopa med dnevnim uporaba. Fluorescenčni mikroskopi se razlikujejo od navadnih mikroskopov v naslednjih pogledih:
1. Metoda osvetlitve je običajno episkopska, to pomeni, da se vir svetlobe projicira na vzorec skozi lečo objektiva;
2. vir svetlobe je ultravijolična svetloba, valovna dolžina je krajša, ločljivost pa višja kot pri navadnih mikroskopih;
3. Obstajata dva posebna filtra, tisti pred virom svetlobe se uporablja za filtriranje vidne svetlobe, tisti med okularjem in lečo objektiva pa se uporablja za filtriranje ultravijoličnih žarkov za zaščito človeškega očesa.
Fluorescenčni mikroskop je tudi neke vrste optični mikroskop, glavna razlika je v tem, da je valovna dolžina vzbujanja obeh različna. To določa razliko med fluorescenčnim mikroskopom in običajnim optičnim mikroskopom glede strukture in uporabe.
Fluorescenčna mikroskopija je bistveno orodje v imunofluorescentni citokemiji. Sestavljen je iz glavnih komponent, kot so vir svetlobe, sistem filtrirnih plošč in optični sistem. Gre za uporabo določene valovne dolžine svetlobe za vzbuditev vzorca, da oddaja fluorescenco, in opazovanje fluorescenčne slike vzorca z ojačanjem leče objektiva in sistema okularja. Široko se uporablja na področju bioloških in medicinskih raziskav.
