Kakšna je razlika med fluorescenčnim mikroskopom in invertnim mikroskopom?
Mikroskop je pomemben instrument v celični kulturi in sorodnih eksperimentih z derivati. Trenutno so na trgu različne vrste mikroskopov. Izziv je izbrati mikroskop, ki ustreza vašim potrebam in je primeren. V nadaljevanju so predstavljena načela invertnih mikroskopov in fluorescenčnih mikroskopov, tako da lahko preprosto izberete.
Sestava invertnega mikroskopa je enaka kot pri običajnem mikroskopu in vključuje predvsem tri dele: mehanski del, osvetljevalni del in optični del.
Sestava invertnega mikroskopa je enaka kot pri navadnem pokončnem mikroskopu, le da sta leča objektiva in osvetljevalni sistem obrnjena, prva je pod mizico, druga pa nad mizico.
Ta struktura omogoča, da se efektivna razdalja med sistemom za koncentriranje osvetlitve in mizico znatno poveča, kar je primerno za postavitev debelejših predmetov za opazovanje, kot so petrijevke in bučke za celične kulture (seveda so sprejemljiva tudi stekelca). Ni nujno, da je delovna razdalja med njimi zelo velika.
Invertni mikroskop se uporablja za opazovanje mikroorganizmov, celic, bakterij, tkivnih kultur, suspenzij, sedimentov ipd. v medicinskih in zdravstvenih enotah, fakultetah in univerzah ter raziskovalnih inštitutih. Lahko neprekinjeno opazuje proces razmnoževanja in delitve celic in bakterij v gojišču ter lahko fotografira katero koli obliko tega procesa.
Široko se uporablja v citologiji, parazitologiji, onkologiji, imunologiji, genskem inženirstvu, industrijski mikrobiologiji, botaniki in drugih področjih.
Fluorescenčna mikroskopija se uporablja za preučevanje absorpcije, transporta, porazdelitve in lokalizacije kemičnih snovi v celicah.
Za objekt, ki ga pregledamo, obstajata dva načina ustvarjanja fluorescence: avtofluorescenca, ki oddaja fluorescenco neposredno po ultravijoličnem obsevanju; sekundarna fluorescenca, ki lahko oddaja fluorescenco, potem ko je opazovani objekt obdelan s fluorescenčnimi barvili in nato obsjan z ultravijolično svetlobo.
Nekatere snovi v celicah, kot je klorofil, po obsevanju z ultravijoličnimi žarki proizvajajo avtofluorescenco; nekatere snovi same ne morejo fluorescirati, če pa jih obarvamo s fluorescenčnimi barvili ali fluorescentnimi protitelesi, lahko po obsevanju z ultravijoličnimi žarki oddajajo tudi sekundarno fluorescenco.
Fluorescenčni mikroskop uporablja točkovni svetlobni vir z visoko svetlobno učinkovitostjo in oddaja svetlobo določene valovne dolžine (ultravijolično svetlobo 365 nm ali vijolično modro svetlobo 420 nm) skozi sistem barvnega filtra kot vzbujevalno svetlobo, potem ko vzbudi fluorescentne snovi v vzorcu, da oddajajo različne barve fluorescence, nato pa opazujte s povečavo objektiva in okularjev.
Pod močnim kontrastnim ozadjem, tudi če je fluorescenca zelo šibka, ga je enostavno prepoznati in ima visoko občutljivost. Uporablja se predvsem za preučevanje celične strukture in delovanja ter kemične sestave.
