Metode obdelave vzorcev in koraki za elektronsko mikroskopijo
Pred uporabo transmisijskega elektronskega mikroskopa za opazovanje bioloških vzorcev je treba vzorce predhodno obdelati. Znanstveniki uporabljajo različne metode obdelave, kot zahtevajo različne raziskovalne zahteve.
Fiksacija: Da bi vzorec čim bolj ohranili, se uporablja glutaraldehid za utrjevanje, osmična kislina pa za barvanje maščobe.
Hladna fiksacija: vzorec se hitro zamrzne v tekočem etanu, tako da voda ne kristalizira in namesto tega tvori amorfen led. Tako ohranjeni vzorci so manj poškodovani, vendar je kontrast slike zelo nizek.
Dehidracija: Vodo nadomestite z etanolom in acetonom.
Podložen: Vzorec se lahko razdeli, potem ko je podložen.
Segmentacija: vzorec se z diamantnim rezilom razreže na tanke rezine.
Barvanje: težki atomi, kot sta svinec ali uran, sipajo elektrone močneje kot lažji atomi in jih je zato mogoče uporabiti za povečanje kontrasta.
Pred uporabo transmisijskega elektronskega mikroskopa za opazovanje kovin je treba vzorec
Virusi pod elektronskim mikroskopom
Rezanje na zelo tanke rezine (približno 0,1 mm) in nato uporaba elektrolitskega poliranja za nadaljnje redčenje kovine pogosto konča z oblikovanjem luknje v središču vzorca, kjer lahko elektroni prehajajo skozi zelo tanko kovino. Kovine, ki jih ni mogoče elektrolitsko polirati, ali materiali, ki niso prevodni ali imajo slabo prevodnost, kot je silicij, se na splošno stanjšajo mehansko in nato obdelajo z ionskim udarom. Da neprevodni vzorci ne bi kopičili statične elektrike v vrstičnem elektronskem mikroskopu, morajo biti njihove površine prekrite s prevodno plastjo.
Zakaj imajo elektronski mikroskopi višjo ločljivost?
Kot že ime pove, je tako imenovani elektronski mikroskop mikroskop, ki kot vir osvetlitve uporablja elektronske žarke. Ker se lahko elektronski žarek pod delovanjem zunanjega magnetnega ali električnega polja upogne, kar povzroči lomni pojav, podoben pojavu vidne svetlobe, ki prehaja skozi steklo, lahko uporabimo ta fizični učinek, da ustvarimo "lečo" za elektronski žarek, s čimer razvoj elektronskega mikroskopa. Značilnost transmisijskega elektronskega mikroskopa (TEM) je, da uporabljamo elektronske žarke, ki prehajajo skozi vzorec do slike, kar se razlikuje od vrstičnega elektronskega mikroskopa (Scanning Electron Microscope, SEM). Ker je valovna dolžina elektronskih valov veliko manjša od valovne dolžine vidne svetlobe (valovna dolžina 100kV elektronskih valov je 0,0037nm, medtem ko je valovna dolžina vijolične svetlobe 400nm), glede na optično Po teoriji lahko pričakujemo, da bo ločljivost elektronskih mikroskopov veliko boljša od ločljivosti optičnih mikroskopov. Pravzaprav je ločljivost sodobnih elektronskih mikroskopov dosegla 0,1 nm. Izbirni učbenik fizika za srednješolce to podrobneje pojasnjuje (majhen podatek v ozadju fotoelektričnega učinka)
