Zahteve za izdelavo vzorcev fluorescentnega mikroskopa
（1） Stekelec
Debelina diapozitiva mora biti med 0,8 in 1,2 mm. Če je stekelec predebel, po eni strani absorbira več svetlobe, po drugi strani pa ne more povzročiti zbiranja vzbujevalne svetlobe na preparatu. Stekelec mora biti gladek, enakomerne debeline in brez očitne spontane fluorescence. Včasih so potrebna stekelca iz kremenčevega stekla.
（2） Pokrivno steklo
Debelina pokrovnega stekla je približno 0,17 mm, ki je gladko in čisto. Za povečanje vzbujanja je mogoče uporabiti tudi interferenčno pokrivno steklo. To je posebej zasnovano pokrivno steklo z več plastmi snovi (kot je magnezijev fluorid), ki imajo različne interferenčne učinke na različne valovne dolžine svetlobe. Omogoča nemoteno prehajanje fluorescence, medtem ko lahko vzbujanje refleksije vzbudi vzorec.
（3） Primerek
Rezine tkiva ali drugi preparati ne smejo biti predebeli, saj se vzbujevalna svetloba večinoma porabi v spodnjem delu preparata, medtem ko zgornji del, ki ga neposredno opazujemo z lečo objektiva, ni popolnoma vzbujen. Poleg tega lahko prekrivanje celic ali prikrivanje nečistoč vpliva na presojo.
（4） Tesnilno sredstvo
Kot pritrdilno sredstvo se običajno uporablja glicerin, ki mora biti brez spontane fluorescence, brezbarven in prozoren. Svetlost fluorescence je svetlejša pri pH 8,5~9,5 in ni lahko hitro zbledeti. Zato se kot tesnilno sredstvo običajno uporablja enaka mešanica glicerola in 0.5mol/l karbonatnega pufra pri pH 9.0-9.5.
（5） Olje za ogledala
Pri opazovanju preparatov s fluorescenčnim mikroskopom s temnim poljem in oljnim mikroskopom je nujna uporaba olja za leče. Najbolje je, da uporabite posebej izdelano nefluorescentno olje za leče, ki ga lahko nadomestite tudi z glicerolom, kot je navedeno zgoraj. Lahko se uporablja tudi tekoči parafin, vendar je lomni količnik nizek in rahlo vpliva na kakovost slike.
Previdnostni ukrepi za uporabo fluorescenčnega mikroskopa
(1) Strogo upoštevajte zahteve tovarniškega priročnika za fluorescenčni mikroskop in ne spreminjajte programa samovoljno.
(2) Pregled je treba opraviti v temnem prostoru. Po vstopu v temnico priključite napajalnik in prižgite ultravisokotlačno živosrebrno žarnico za 5 do 15 minut. Ko svetlobni vir odda močno svetlobo in se stabilizira, se oči popolnoma prilagodijo temnici, preden začnejo opazovati preparat.
(3) Da bi preprečili UV-poškodbe oči, morate pri nastavljanju vira svetlobe nositi zaščitna očala.
(4) Čas inšpekcijskega pregleda mora biti vsakokrat 1-2 ur. Če preseže 90 minut, se jakost svetlobe ultravisokotlačne živosrebrne žarnice postopoma zmanjšuje in fluorescenca oslabi; Po izpostavitvi ultravijoličnemu sevanju 3-5 minut se je tudi fluorescenca vzorca znatno zmanjšala; Torej ne sme preseči največ 2-3 ur.
(5) Življenjska doba svetlobnega vira fluorescenčnega mikroskopa je omejena, zato je treba vzorec pregledati centralno, da prihranite čas in zaščitite svetlobni vir. Ko je vreme vroče, je treba dodati električni ventilator za odvajanje toplote in hlajenje. Pri zamenjavi nove žarnice je treba čas uporabe beležiti od začetka. Ko je svetilka ugasnjena in jo želimo ponovno uporabiti, mora počakati, da se žarnica popolnoma ohladi, preden jo prižgemo. Izogibajte se večkratnemu vžigu svetlobnega vira.
(6) Opazujte vzorec takoj po barvanju, saj se fluorescenca sčasoma postopoma zmanjšuje. Če je vzorec shranjen v polietilenski plastični vrečki pri 4 stopinjah, lahko upočasni čas slabljenja fluorescence in prepreči izhlapevanje pritrdilnega sredstva.
(7) Standard za presojo fluorescenčne svetlosti je na splošno razdeljen na štiri ravni, in sicer "ena" - brez ali vidna šibka fluorescenca. +- Vidna je le jasno vidna fluorescenca. ++- Vidno s svetlo fluorescenco. '+++' – Vidna in bleščeča fluorescenca.
