Razmerje med skupno povečavo in ločljivostjo v oljni potopni mikroskopiji
Cilji mikroskopov, ki se uporabljajo v mikrobioloških raziskavah, so običajno tri vrste: nizka povečava (1 {{2 0}} x), velika povečava (4 0 x) in povečava olja (100x). Obstaja tudi beseda "oi" (potopitev olja), ki kaže, da ima najvišjo povečavo med tremi. Glede na povečavo uporabljenega okularja lahko objekt, ki ga pregledate, povečate 1000-1600 krat. Pri uporabi je razlika med oljno potopno lečo in drugimi cilji v tem, da med steklenim diapozitivom in objektivnim lečo ni plasti zraka, temveč plast olja, imenovane oljni potopni sistem. Ta vrsta olja je pogosto izbrana kot Cedarwood Oil, ker je njen lomni indeks n =1. 52, ki je enak steklu. Ko svetloba prehaja skozi stekleni diapozitiv, lahko neposredno vstopi v objektivno lečo skozi cedrovo olje brez loma. Če je medij med steklenim diapozitivom in objektivno lečo zrak, se imenuje suh sistem. Ko svetloba prehaja skozi stekleni diapozitiv, se lomi in raztrese, in količina svetlobe, ki vstopa v objektivno lečo, se očitno zmanjša, kar zmanjša osvetlitev vidnega polja. Uporaba oljnih ogledal ne samo poveča osvetlitev, ampak tudi v glavnem poveča številčno odprtino, saj učinkovitost povečave mikroskopa določa njena numerična zaslonka. Tako imenovana numerična odprtina se nanaša na produkt polovice sinusa največjega kota, pri katerem se svetloba projicira na objektivno lečo (znano kot leča), pomnožena z indeksom loma medija med steklenim diapozitivom in objektivnim lečo. Lahko se izrazi z naslednjo formulo: na=n × sin, kjer je na=numerična odprtina; N=indeks loma medija;=polovica največjega kota vpada, tj. Polovica kota ogledala. Zato je večji kot, ko se svetloba projicira na objektivno lečo, večja je učinkovitost mikroskopa, velikost tega kota pa je odvisna od premera in goriščne razdalje objektivne leče. Medtem je teoretična meja A 90 .. sin90. Če je vpadni kot svetlobe 120o in polovica njegovega sinusa sin60o =0. 87, potem: ko uporabljate zrak kot medij: na =1 × 0. 87=0. 87; pri uporabi vode kot medija: na =1. 33 × 0. 87=1. 15; Pri uporabi asfalta kot medija: na =1. 52 × 0. 87=1. 32. Ločljivost mikroskopa se nanaša na njegovo sposobnost razlikovanja najmanjše razdalje med dvema točkama. Je neposredno sorazmerna s številčno odprtino objektivne leče in obratno sorazmerna z dolžino valovne dolžine. Zato je večja numerična odprtina objektivne leče, krajša je valovna dolžina svetlobnega vala, večja je ločljivost mikroskopa in jasnejša je mogoče razlikovati fino strukturo predmeta, ki ga pregledate.
Zato je večja numerična odprtina objektivne leče, krajša je valovna dolžina svetlobnega vala, večja je ločljivost mikroskopa in jasnejša je mogoče razlikovati fino strukturo predmeta, ki ga pregledate. Zato visoka ločljivost pomeni majhno razlikovalno razdaljo in ta dva dejavnika sta obratno sorazmerna. Nekateri ljudje običajno opišejo ločljivost kot koliko mikrometrov ali nanometrov, kar dejansko zmede ločljivost z minimalno razdaljo ločljivosti. Ločljivost mikroskopa je predstavljena z minimalno razdaljo, ki jo je mogoče rešiti. Najmanjša razdalja, ki lahko loči med dvema točkama, je λ/2na, kjer λ=valovna dolžina svetlobnega vala. Povprečna dolžina svetlobnega vala, ki jo lahko zazna golo oko, je 0. 55 μm. Če je numerična odprtina 0. 65 za objektivno objektiv z visoko močjo, lahko razlikuje razdaljo med dvema točkama kot 0. 42 μ m. Vendar razdalje med dvema točkama spodaj 0. Le z uporabo večjega objektivnega objektiva z večjo številčno zaslonko se lahko poveča njegova ločljivost. Na primer, pri uporabi oljnega ogledala s numerično odprtino 1,25 je najmanjša razdalja med dvema točkama, ki ju je mogoče razlikovati, 0. 55/(2 × 1,25) =0. 22 μ m. Zato lahko vidimo, da če se uporabi objektivna leča z veliko močjo s povečavo 4 0 (na =0. Če je oljno ogledalo s povečavo 90 -krat (na =1. 25) in okular s povečavo 9 -krat, čeprav je skupna povečava 810 -krat, lahko ločimo razdaljo 0,22 μm.
