Laserski konfokalni mikroskop Načelo delovanja
Laserska konfokalna mikroskopija temelji na slikanju s fluorescenčnim mikroskopom z dodatkom naprave za lasersko skeniranje, uporabi računalniške obdelave slike, ločljivosti optičnega slikanja, povečane za 30 % - 40 %, uporabi vzbujanja ultravijolične ali vidne svetlobe fluorescentnih sonde, da bi pridobili fluorescenčno sliko notranje mikrostrukture celic ali tkiv, na podcelični ravni za opazovanje fizioloških signalov in sprememb celične morfologije, kot so Ca2+, PH, membranski potencial itd. nova generacija močnih raziskovalnih orodij v morfologiji, molekularni biologiji, nevroznanosti, farmakologiji, genetiki in drugih področjih. Laserski konfokalni slikovni sistem je zmogljiva nova generacija raziskovalnih orodij na področjih morfologije, molekularne biologije, nevroznanosti, farmakologije, genetike itd. Laserski sistem za konfokalno slikanje se lahko uporablja za opazovanje različnih obarvanih, neobarvanih in fluorescentno označenih tkiv in celic itd., za opazovanje in proučevanje rasti in razvoja tkivnih delov in celic in vivo ter za preučevanje in merjenje znotrajceličnega transport snovi in pretvorba energije. Sposoben je izvajati študije ionskih in PH sprememb v živih celicah (RATIO), raziskave nevrotransmiterjev, diferencialne interference in fluorescenčno tomografijo, večkratno fluorescenčno tomografijo in prekrivanje, fluorescenčno spektroskopijo, analizo fluorescenčnih indikatorjev, kvantitativno analizo fluorescenčnih vzorcev časovno- odloženo skeniranje in dinamične komponente tridimenzionalne dinamične strukture tkiv in celic, analiza prenosa fluorescenčne resonančne energije, fluorescenčne in situ hibridizacijske raziskave (FISH), citoskeletne raziskave (FISH) in študij citoskeleta. FISH), raziskave citoskeleta, raziskave lokalizacije genov, analiza produktov PCR v realnem času in situ, raziskave obnavljanja fluorescenčnega beljenja (FRAP), raziskave medcelične komunikacije, raziskave med beljakovinami, raziskave membranskega potenciala in membranske fluidnosti itd., da se zaključi analiza analize slike in tridimenzionalne rekonstrukcije ter druge analize.
Področja uporabe sistema laserskega konfokalnega mikroskopa:
Vključuje medicino, znanstvene raziskave na živalih in rastlinah, biokemijo, **ologijo, celično biologijo, tkivni zarodek, znanost o hrani, genetiko, farmakologijo, fiziologijo, optiko, patologijo, botaniko, nevroznanost, morsko biologijo, znanost o materialih, elektroniko, mehaniko, nafto geologija, mineralogija.
Osnovna načela
Tradicionalni optični mikroskop uporablja poljski svetlobni vir, slika vsake točke na vzorcu bo motena zaradi uklona ali sipanja svetlobe iz sosednjih točk; laserski konfokalni mikroskop uporablja laserski žarek skozi luknjo za osvetljevanje, da oblikuje točkovni vir svetlobe za skeniranje vsake točke na goriščni ravnini vzorca, obsevana točka na vzorcu bo prikazana na luknjici za zaznavanje, nato pa jo bo sprejela luknjico za zaznavanje po cevki za množilno točko (PMT) ali napravi za hladno elektrosklopko (cCCD), točko za točko ali črto za črto, nato pa se hitro prikaže na računalniškem monitorju. Fluorescentna slika, ki jo sprejme PMT ali cCCD za luknjico sonde, točko za točko ali vrstico za vrstico, se hitro oblikuje na zaslonu računalniškega monitorja. Luknjica za osvetlitev in luknjica za zaznavanje sta konjugirani glede na goriščno ravnino leče objektiva, točke na goriščni ravnini so osredotočene na luknjico za osvetljevanje in luknjico za sevanje hkrati, točke zunaj goriščne ravnine pa ne bodo slikati na luknjici za zaznavanje, tako da je konfokalna slika optični prerez vzorca, s čimer je odpravljena pomanjkljivost mehke slike navadnega mikroskopa.
Laserski konfokalni mikroskop Načelo delovanja
