Uvod v izbiro med invertnimi mikroskopi in fluorescenčnimi mikroskopi
Mikroskop je pomemben instrument v celični kulturi in sorodnih eksperimentih z derivati. Trenutno so na trgu različne vrste mikroskopov in izbira mikroskopa, ki ustreza potrebam in je primeren, je izziv. Spodaj bomo predstavili principe invertnih mikroskopov in fluorescenčnih mikroskopov za lažjo izbiro.
Sestava invertnega mikroskopa je enaka kot pri običajnem mikroskopu, sestavljena je predvsem iz treh delov: mehanskega dela, osvetlitvenega dela in optičnega dela. Sestava invertnega mikroskopa je enaka navadnemu pokončnemu mikroskopu, le da sta leča objektiva in osvetljevalni sistem obrnjena, pri čemer je prva pod mizico, druga pa nad mizico. Ta struktura omogoča znatno povečanje efektivne razdalje med sistemom za ostrenje osvetlitve in mizico, kar olajša namestitev debelejših instrumentov za opazovanje, kot so posodice za kulture in stekleničke za celične kulture (seveda so sprejemljiva tudi stekelca), medtem ko delovna razdalja med lečo objektiva in materialom ni nujno velika. Invertni mikroskop uporabljajo zdravstvene in zdravstvene ustanove, univerze in raziskovalni inštituti za opazovanje mikroorganizmov, celic, bakterij, tkivnih kultur, suspenzij, usedlin itd. Lahko neprekinjeno opazuje proces razmnoževanja in delitve celic in bakterij v gojišču in lahko zajame poljubno stanje med tem procesom. Široko se uporablja na področjih, kot so citologija, parazitologija, onkologija, imunologija, genski inženiring, industrijska mikrobiologija, botanika itd.
Fluorescenčna mikroskopija se uporablja za preučevanje absorpcije, transporta, porazdelitve in lokalizacije snovi v celicah. Za preizkušani objekt obstajata dva načina generiranja fluorescence: spontana fluorescenca, ki neposredno oddaja fluorescenco po UV obsevanju; Sekundarna fluorescenca se pojavi, ko opazovani predmet obdelamo s fluorescenčnimi barvili in nato obsevamo z ultravijolično svetlobo, da oddaja fluorescenco. Nekatere snovi v celicah, kot je klorofil, proizvajajo spontano fluorescenco, če so izpostavljene ultravijoličnemu sevanju; Nekatere snovi same ne morejo oddajati fluorescence, če pa jih obarvamo s fluorescenčnimi barvili ali fluorescentnimi protitelesi, lahko oddajajo tudi sekundarno fluorescenco po obsevanju z ultravijolično svetlobo. Fluorescenčni mikroskop uporablja visoko učinkovit točkovni svetlobni vir za oddajanje določene valovne dolžine svetlobe (ultravijolično svetlobo 365 nm ali vijolično modro svetlobo 420 nm) skozi sistem barvnega filtra kot vzbujevalno svetlobo, ki vzbudi fluorescentne snovi v vzorcu, da oddajajo različne barve fluorescence, nato pa opazuje skozi povečavo objektiva in okularja. Na ta način ga je tudi pri šibki fluorescenci v močnem ozadju enostavno prepoznati in ima visoko občutljivost. Uporablja se predvsem za preučevanje celične strukture, delovanja in kemične sestave.
