Kako izbrati med invertnim mikroskopom in fluorescenčnim mikroskopom?
V celičnih kulturah in sorodnih poskusih z izpeljavo je mikroskop zelo pomemben instrument. Trenutno so na trgu različne vrste mikroskopov. Izziv je izbrati mikroskop, ki ustreza potrebam in je uporaben. Sledi uvod v principe invertnih mikroskopov in fluorescenčnih mikroskopov, tako da boste lažje izbirali.
Sestava invertnega mikroskopa je enaka kot pri običajnem mikroskopu, v glavnem vključuje tri dele: mehanski del, osvetljevalni del in optični del. Sestava invertnega mikroskopa je enaka kot pri običajnem pokončnem mikroskopu, le da sta leča objektiva in osvetljevalni sistem obrnjena, prva je pod mizico, druga pa nad mizico. Takšna struktura lahko znatno poveča efektivno razdaljo med sistemom za koncentriranje osvetlitve in odrom, kar je priročno za postavitev debelejših predmetov za opazovanje, kot so posodice za kulture in stekleničke za celične kulture (seveda so na voljo tudi predmetna stekelca itd.) , hkrati pa razdalja med lečo objektiva in materialom Ni nujno, da je delovna razdalja med njima zelo velika. Invertni mikroskopi se uporabljajo za opazovanje mikroorganizmov, celic, bakterij, tkivnih kultur, suspenzij, sedimentov itd. v medicinskih in zdravstvenih ustanovah, visokošolskih ustanovah in raziskovalnih inštitutih. Nenehno lahko opazuje proces razmnoževanja in delitve celic, bakterij itd. v gojišču in lahko med tem posname fotografije katere koli oblike. Široko se uporablja v citologiji, parazitologiji, onkologiji, imunologiji, genskem inženirstvu, industrijski mikrobiologiji, botaniki in drugih področjih.
Fluorescenčna mikroskopija se uporablja za preučevanje absorpcije in transporta snovi v celicah, porazdelitve in lokalizacije kemičnih snovi itd. Za objekt, ki ga pregledujemo, obstajata dva načina za ustvarjanje fluorescence: avtofluorescenca, ki oddaja fluorescenco neposredno po obsevanju z ultravijoličnimi žarki. svetloba; Nekatere snovi v celicah, kot je klorofil, po obsevanju z ultravijoličnimi žarki proizvajajo avtofluorescenco; čeprav nekatere snovi same ne morejo fluorescirati, lahko oddajajo tudi sekundarno fluorescenco, potem ko so po obsevanju z ultravijoličnimi žarki obarvani s fluorescenčnimi barvili ali fluorescentnimi protitelesi. Fluorescenčni mikroskop uporablja točkovni vir svetlobe z visoko svetlobno učinkovitostjo za oddajanje svetlobe določene valovne dolžine (ultravijolična svetloba 365 nm ali vijolično modra svetloba 420 nm) skozi sistem filtrov kot vzbujevalna svetloba in po vzbujanju fluorescenčnih snovi v vzorcu oddaja fluorescenco različnih barv, potem Opazovanje poteka s povečavo leče objektiva in okularja. Na ta način ga je pod močnim kontrastnim ozadjem, tudi če je fluorescenca zelo šibka, enostavno prepoznati in ima visoko občutljivost. Uporablja se predvsem za raziskave celične strukture in delovanja ter kemične sestave.
Fluorescenčne mikroskope delimo na transmisijske in epi-izmetne, pri čemer je prvi bolj primitiven, drugi pa naprednejši. Osnovna zgradba obeh vrst fluorescenčnih mikroskopov je podobna, glavna razlika je v tem, da vzbujevalna svetloba transmisijskega tipa prehaja skozi vzorec, celoten vzorec pa ustvari fluorescenco, ki nato vstopi v lečo objektiva. Večja kot je povečava, šibkejša je fluorescenca; vzbujevalna svetloba tipa epiemisije se projicira na površino vzorca, površina vzorca proizvede fluorescenco in fluorescenca ponovno vstopi v lečo objektiva. Večja kot je povečava, močnejša je fluorescenca, ki je primerna za opazovanje z veliko povečavo. Glavne komponente fluorescenčnega mikroskopa vključujejo svetlobni vir živosrebrne svetilke, vzbujevalno filtrirno ploščo, dihroično zrcalo (epizodni tip), stisnjeno filtrirno ploščo in kondenzator temnega polja (prepustni tip) itd. Poleg tega zaradi močno segrevanje živosrebrnih žarnic, večina jih je opremljenih tudi s filtri, ki absorbirajo toploto. Nekateri fluorescenčni mikroskopi imajo tudi fazno kontrastne objektive in obročaste diafragme, tako da so možna opazovanja faznega kontrasta. Obstajajo tudi fluorescenčni mikroskopi z obrnjeno strukturo, drugi invertni mikroskop itd.
Poleg tega je omenjene mikroskope mogoče sestaviti v digitalni mikroskop z vgradnjo CCD-ja, ki z digitalno-analogno pretvorbo pretvori fizično sliko, ki jo vidi mikroskop, v sliko na računalniku. Zato lahko raziskavo na mikroskopskem polju spremenimo iz tradicionalnega navadnega binokularnega opazovanja v reprodukcijo na zaslonu in s tem izboljšamo učinkovitost dela.
