Biološki mikroskop na volumen tkivnega bloka
Biološki mikroskop s kondenzatorjem lahko premika kondenzor gor in dol, da postane njegova svetlost zmerna, prav tako pa lahko spremeni zaslonko analizatorja spremenljive svetlobe, da doseže zmerno svetlost 9b. Če je svetloba v soncu, lahko kondenzor ustrezno dvignemo in zaslonko spremenljivega optičnega šuma ustrezno povečamo. Če je svetloba premočna, lahko kondenzor ustrezno znižamo in ustrezno zmanjšamo odprtino presečišča. Če se v tem primeru še vedno počutite bleščeče, lahko izberete ustrezen filter in ga namestite na nosilec pod kondenzatorjem. Ta tussah lahko pridobi svetlost, ki vas zadovolji. Seveda je treba po določenem obdobju vaje pridobiti izkušnje pri nastavljanju zgornjega in spodnjega položaja kondenzorja za spreminjanje velikosti zaslonke optičnega odčitka in izbiro ustreznih filtrov.
Zelo pomembna težava biomikroskopa je, da je treba vsebino 65 elementov v vsakem delu po liofilizaciji in vdelavi smole (FD) in liofilizaciji skrbno ravnati, da ne poškodujemo celic, ki jih opazujemo in analiziramo. Ker mikroanaliza z rentgenskimi žarki ne vključuje le številnih korakov, ampak tudi veliko stane, je zelo obžalovanja vredno narediti napačen sklep, če so analizirane celice poškodovane ali odmrle celice po dolgotrajnem in večstopenjskem zdravljenju. Na primer, miokardne celice, ločene z obdelavo s kolagenazo, imajo dve obliki, ena je dolga palica in druga je okrogla. Slednja je odmirajoča celica, ki se med ločevanjem celic poškoduje.
Vsebnost in porazdelitev elektrolitov v teh dveh vrstah celic sta pod biološkim mikroskopom zelo različni. Na je zelo visok in K je zelo nizek v okroglih miokardnih celicah, koncentracija Ca v linearnih dendritih pa je zelo visoka. V primerjavi z drugimi analiznimi metodami je dokazano, da sta visoka vsebnost Na in nizka vsebnost K v krožnih celicah ter visoka ca v mitohondrijih posledica poškodbe celične membrane med ločevanjem celic. Metoda hladne fiksacije celic in tkiv je pogosto ta, da jih najprej fiksiramo s kaljenjem in nato shranimo v tekočem dušiku. Pritrjevanje s kaljenjem je zelo pomembno za učinek konzerviranja. Žive celice ali sveža tkiva so bogata z vodo. Pri kaljenju se pogosto zgodi, da se deli celic ali tkiv, ki so v neposrednem stiku s krioprotektorji (predvsem pri kaljenju s tekočim dušikom), najprej zamrznejo in fiksirajo ter tako tvorijo »lupino«, ki ovira zamrzovanje in fiksacijo centralnega del celic. Zato se pri rentgenski mikroanalizi pogosto ugotovi, da so v središču večjih celic ledeni kristali. Da se to ne bi zgodilo, se kot hladilno sredstvo uporablja snov s tališčem, ki je višje od tališča tekočega dušika, a temperatura sušenja nižja od 806C. Takih snovi je veliko, vendar je najlažje dostopna koncentrirani propan (vrelišče-42．120c, tališče-187．10c, molekulska masa-44.1), ki ima najhitrejša hitrost hlajenja. Toda njegova pomanjkljivost je vnetljivost.
Biološki mikroskop lahko postavi mišično vlakno na poseben okvir, in ko se mišično vlakno skrči v določeno fazo in ga je treba fiksirati, se takoj zažene šoba, tako da se tekoči propan razprši na mišično vlakno, da se duši in fiksira to. Nato mišična vlakna skupaj s stojalom vzamemo ven in damo v tekoči dušik. Če so krvne celice ali ločene celice fiksirane, najprej centrifugirajte pri nizki hitrosti, da koncentrirate celice, prenesite celice v srebrno majhno epruveto z dobro toplotno prevodnostjo in postavite majhno epruveto v tekoči propan za zamrzovanje in fiksiranje. Pri fiksiranju podganje trebušne slinavke v Hallovem laboratoriju so dva jeklena bloka predhodno ohladili s tekočim helijem (ali tekočim dušikom), dva bakrena bloka pa so s kleščami postavili pred in za trebušno slinavko, tako da so se tete kalile in fiksirale. Tkivo ali celice se lahko dolgo časa hranijo po tem, ko se ohladijo in fiksirajo ter prenesejo v tekoči dušik.
