Uporaba in uporaba principov fluorescenčnega mikroskopa
Načela in strukturne značilnosti fluorescenčnih mikroskopov: Fluorescenčni mikroskopi uporabljajo točkovni svetlobni vir z visoko svetlobno učinkovitostjo za oddajanje svetlobe določene valovne dolžine (kot je ultravijolična svetloba 3650 in ali vijolično-modra svetloba 4200 in) skozi sistem barvnega filtra kot vzbujevalna svetloba za vzbudijo fluorescenco v vzorcu. Ko snov oddaja fluorescenco različnih barv, jo nato opazujemo skozi povečavo objektiva in okularja. Na ta način ga je pod močnim kontrastnim ozadjem, tudi če je fluorescenca zelo šibka, enostavno prepoznati in ima visoko občutljivost. Uporablja se predvsem za preučevanje celične strukture in delovanja ter kemične sestave. Osnovna zgradba fluorescenčnega mikroskopa je sestavljena iz običajnega optičnega mikroskopa in nekaterih dodatkov (kot je vir fluorescenčne svetlobe, vzbujevalni filter, dvobarvni cepilnik žarka, blokirni filter itd.). Fluorescentni svetlobni vir - običajno uporablja ultravisokotlačno živosrebrno sijalko (50 do 200 W), ki lahko oddaja svetlobo različnih valovnih dolžin, vendar ima vsaka fluorescentna snov vzbujevalno valovno dolžino, ki proizvaja najmočnejšo fluorescenco, zato je vzbujevalni filter (na splošno obstajajo ultravijolični, vijolični, modri in zeleni vzbujevalni filtri), ki prepuščajo samo vzbujevalni svetlobi določene valovne dolžine, da preide in osvetli vzorec, vso ostalo svetlobo pa absorbira. Ko je vsaka snov obsevana z vzbujevalno svetlobo, oddaja vidno fluorescenco z daljšo valovno dolžino od valovne dolžine obsevanja v zelo kratkem času. Fluorescenca je specifična in je na splošno šibkejša od vzbujalne svetlobe. Za opazovanje specifične fluorescence je za lečo objektiva potreben blokirni (ali dušilni) filter. Ima dve funkciji: ena je absorbirati in blokirati vzbujevalno svetlobo pred vstopom v okular, da prepreči motenje fluorescence in poškodbe oči; drugo pa je izbrati in dovoliti, da določena fluorescenca preide skozi, da pokaže določeno barvo fluorescence. Oba filtra je treba izbrati in uporabiti skupaj.
